Определение концентрации бактерицида в СОЖ
1.1. Метод основан на разложении формальдегидвыделяющих компонентов бактерицида при действии 3-метил-2-бензтиазолинон-гидразон гидрохлорида(МВТН) и последующем окислении продуктов реакции хлоридом железа с образованием окрашенного соединения.
Колориметрирование окрашенного соединения проводят по способу стандартных серий. Окраска раствора в зависимости от содержания бактерицида меняется от желто-зеленой до синей.
2. Аппаратура и реактивы
Весы лабораторные аналитические типа ЛА-200 | ГОСТ 24104-80 |
Весы лабораторные технические типа ВЛТ-200 | ГОСТ 21104-80 |
Пипетки вместимостью 0,1;5 мл | ГОСТ 20292-74 |
Капилляры 0,01;0,05 мл | |
Колбы конические,емкостью 250 мл | ГОСТ 1770-74 |
Воронки стеклянные диаметром 90 мм | ГОСТ 25336-82 |
Стаканы стеклянные емкостью 50 мл | ГОСТ 25336-82 |
Пробирки стеклянные градуированные с притертой пробкой вместимостью 25 мл | ГОСТ 25336-82 |
Штативы для пробирок | |
Секундомер | ГОСТ 5072-79 |
Груши резиновые | |
Бумага фильтровальная лабораторная | ГОСТ 12026-76 |
3-метил-2-бензтиазолинон гидразин-гидрохлорид (МВТН) 0,1-ный водный раствор | |
Железо хлорное,24%-ный водный раствор | ГОСТ 4147-74 |
Вода дистиллированная | ГОСТ 6709-72 |
Кальций хлористый безводный | ГОСТ 4460-77 |
Магний сернокислый семиводный | ГОСТ 4523-77 |
3. Подготовка к испытанию
3.1. Посуду перед испытанием обезжирить ,тщательно промыть и высушить.
3.2. Раствор 3-метил-2-бензтиазолин-гидразон-гидрохлорида (МВТН) хранить в холодильнике при температуре не выше 5 С в течение 1 месяца.
3.3. Приготовление стандартных растворов СОЖ с известным содержанием бактерицида.
3.3.1. Стандартные растворы СОЖ готовить на воде с общей жесткостью 4,6 мг-экв/л.
3.3.2. Для приготовления воды общей жесткостью 4,6 мг-экв/л. растворить в 1 литре дистиллированной воды 0,3943 г семи-водного сернокислого магния и 0,0815 г безводного хлористого кальция.
3.3.4. Приготовить водный раствор СОЖ,концентрация которой должна быть равна испытуемой СОЖ,для чего навеску концентрата СОЖ , взвешенную на технических весах с точностью до 0,02 г растворить в жесткой воде при постоянном перемешивании раствора.
3.3.5. В конические колбы взвесить соответствующий бактерицид в количествах, равных концентрации бактерицида, вводимой в эмульсию при корректировке ,выше и ниже оптимальной концентрации с интервалом 0,05 г. Например, концентрация бактерицида "Карбамол Б"при корректировке равна 0,15-0,3%, значит навески бактерицида составят 0,1; 0,15; 0,2; 0,25; 0,3; 0,35 г.
3.3.6. Добавить в колбы с навесками бактерицида испытуемую СОЖ до 100 г и тщательно перемешать.
4. Проведение испытания
4.1. В пробирки внести пипеткой по 5 мл 0,1%-ного раствора МВТН.
4.2. Капилляры или микропипетки вместимостью 10 мкл(0,01мл) заполнить исследуемым и стандартным растворами и перенести растворы в пробирки с раствором МВТН.
4.3. Закрыть пробирки пробкой, хорошо встряхнуть и оставить в покое на 30 минут.
4.4. Через 30 минут заполнить микропипетки или капилляры емкостью 50 мкл(0,05 мл) раствором хлорного железа, открыть пробирки и поместить в каждую этот раствор.
4.5. В случае использования капилляров, капилляр вместе с раствором опустить в пробирку.
4.6. Закрыть пробирки пробкой, хорошо встряхнуть и оставить в покое на 8 минут.
5. Обработка результатов
5.1. Концентрацию бактерицида определить визуально путем сравнения интенсивности окраски исследуемого раствора со стандартными.
5.2. Для уменьшения времени проведения анализа и расхода реактивов можно использовать Готовую цветную эталонную шкалу, нанесенную на простую бумагу или фотобумагу по результатам,полученным при испытании стандартных растворов СОЖ с бактерицидом.